Como obtener proteínas altamente puras con la nueva resina Strep-TactinXT Superflow, el enlace Estreptavidina:Biotina es la interacción biológica no covalente más fuerte conocida.
Una de las principales ventajas del sistema Strep-tag es lograr una pureza de proteínas sin precedentes (> 95%) tras la purificación de proteínas recombinantes independientemente del huésped de expresión. Esto hace que el sistema sea más ventajoso que otros sistemas de purificación por afinidad como el His-tag. El sistema Strep-tag de 3ª generación basado en la StrepTactinXT, con su excelente rendimiento hace que el sistema sea el ideal para nuevas aplicaciones como:
– Purificación de lotes
– Condiciones de desnaturalización
– Screening de alto rendimiento
Nuevo Sistema Strep-tag de tercera generación
El sistema Strep-tag de tercera generación de IBA se basa en la nueva resina Strep-TactinXT Superflow en combinación con la Twin-Streptag.
Debido a la afinidad de unión entre la Strep-TactinXT y la Twin-Strep-tag en el rango bajo de pM (¡se acerca a un enlace covalente!!!), el sistema es superior a todos los demás sistemas de purificación por afinidad disponibles en el mercado y puede usarse para una amplia variedad de aplicaciones.
Strep-TactinXT y Strep-Tactin son estreptavidinas manipuladas. La Strep-tag es un péptido formado por la unión de biotina y estreptavidina.
La evolución del sistema Strep-tag se ilustra en la siguiente figura:
Cerca de afinidad de unión covalente
El enlace Estreptavidina:Biotina es la interacción biológica no covalente más fuerte conocida. Gracias al recién desarrollado StrepTactinXT de IBA en combinación con la Twin-Strep-tag, esta alta afinidad de unión se puede usar para, por ejemplo, en purificación de proteínas, análisis de interacción de proteínas o ensayos (por ejemplo, BIAcore).
Al unirse la biotina fuertemente a Strep-TactinXT, puede usarse también para la elución de las proteínas de fusión Twin-Strep-tag
Procedimiento de purificación de Strep-TactinXT en comparación con Strep-Tactin
El procedimiento general de purificación de Strep-TactinXT y Strep-Tactin es el mismo (véase la figura siguiente), sólo se han introducido dos cambios:
• La elución desde la Strep-TactinXT se realiza con biotina
• La regeneración de la resina Strep-TactinXT se realiza con NaOH 10 mM
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