Omicron Variant (B.1.1.529/BA.1) Spike Pseudotyping Vector
La colección de plásmidos pLV-Spike de InvivoGen ha sido diseñada para pseudotipar partículas lentivirales con la proteína SARS-CoV-2 Spike (S). La proteína S es una glicoproteína estructural expresada en la superficie del SARS-CoV-2. Interviene en la fusión de membranas y la entrada viral en las células diana tras la unión al receptor ACE2 del huésped y su escisión por proteasas celulares como TMPRSS2. En particular, la cola citoplásmica C-terminal de la proteína S codifica un presunto motivo de retención del retículo endoplásmico (ER) (KxHxx), que se ha demostrado anteriormente que permite la acumulación de proteínas S del SRAS-CoV en el compartimento intermedio ER-Golgi ( ERGIC) y facilitar su incorporación en nuevos viriones. Se ha demostrado que la eliminación de este motivo (d19) aumenta la expresión de la proteína de pico en pseudovirions.
La producción de partículas pseudotipadas implica la cotransfección de células 293T con un vector de proteína informadora (por ejemplo, GFP), uno o varios plásmidos que codifican las proteínas lentivirales necesarias y los plásmidos pseudotipados pLV-Spike. Las células transfectadas producen partículas lentivirales del SARS-CoV-2 Spike (S) -psudotipadas, que luego se pueden usar para infectar células permisivas, como las células derivadas de HEK293 que expresan ACE2 y las células derivadas de A549 que expresan ACE2-TMPRSS2 .
