El sistema inmunitario innato constituye la primera línea de defensa contra la invasión de patógenos microbianos así como de otras amenazadas potenciales para el huésped.

Como ya mencionó en 1994 Polly Matzinger con su “teoría del peligro”, para que nuestro sistema inmune luche contra algo, además de ser extraño debe ser peligroso.

Los PRRs son un tipo de receptores que reconocen patrones moleculares específicos asociados a patógenos (PAMPs) tales como virus, bacterias, hongos y parásitos.

Ejemplos de PAMPs:

Además, este tipo de receptores se encuentran involucrados también en la detección de señales peligrosas endógenas gracias al reconocimiento de patrones asociados a peligro (DAMPs).

Cuando estos PAMPs o DAMPs son reconocidos por los PRRs, se desencadena una respuesta inflamatoria innata en la que se segregan citocinas/quimiocinas, se liberan péptidos antimicrobianos y células fagocíticas son reclutadas.

En resumen, se ponen en marcha múltiples mecanismos para conseguir una eliminación eficaz del patógeno. Además, resulta crucial su papel para que el sistema inmunitario adaptativo realice su función y le confiera al huésped memoria inmunológica.

IBIAN Technologies, distribuidor oficial de InvivoGen para toda España, suministra una amplia gama de PAMPs para activar los distintos PRRs con una gran especificidad (no hay otra empresa en el mundo que compruebe in Vitro todos sus ligandos así como lo hace InvivoGen).

 Las principales familias de PPRs son:

• TLRs: receptores tipo Toll

• NLRs: receptores tipo Nod

• RLRs: receptores tipo RIG-I

• CDS: sensores de DNA citosólico

• CLRs: receptores lectina tipo C

Además, decir que juegan un papel importante los inflamosomas y la autofagia.

TLRs

• Son proteínas transmembrana de tipo I, con un dominio extracelular rico en leucinas y una cola citoplasmática que contiene un receptor conservado Toll/IL-1 (TIR).

• Reconocen una gran variedad de PAMPs, desde bacterias, hongos, parásitos, virus e incluso componentes lipídicos de la pared celular como lipopolisacáridos y lipopéptidos, componentes de proteínas microbianas como flagelina y ácidos nucleicos como ssRNA o dsDNA con CpG.

• Inician vías de señalización gracias al reclutamiento de distintas moléculas que contienen el dominio TIR: MyD88, TIRAP, TRIF y TRAM, las cuales concluyen con la activación de los FT: NF-kB y AP-1 y por consiguiente, la producción de citocinas inflamatorias, quimiocinas e interferones de tipo I.

 

NLRs

• Son receptores intracelulares que reconocen patrones citoplasmáticos moleculares asociados a patógenos y/o señales de peligro endógenas.

• Poseen una estructura caracterizada por la presencia de repeticiones ricas en leucinas (LRRs) que participan en la detección microbiana, un dominio conservado de unión a nucleótidos (NATCH/NOD) y una región N-terminal encargada de interacciones proteína-proteína.

 RLRs

• Forman una familia de helicasas citoplasmáticas de RNA, las cuales son críticas para respuestas antivirales.

• Cuando son activados, se produce la transcripción de genes que codifican para interferones y otras citocinas.

CDS

• Son sensores citosólicos de dsDNA exógenos, cuya activación conduce a la inducción de interferones y/o producción de citocinas pro-inflamatorias. 

CLRs

• Comprenden una gran familia de proteínas que actúan como receptores fagocíticas de carbohidratos de distintos patógenos.

• Estos receptores están implicados en el reconocimiento de hongos y en la modulación de la respuesta inmune innata mediante la presentación de antígenos a los linfocitos T.

Inflamasomas

• Son complejos multiproteicos ensamblados por NLRs encargados de la activación de la caspasa –1, lo cual se consigue tras la maduración autoproteolítica del inflamasoma, conduciendo finalmente a la secreción de citocinas pro-inflamatorias.

• Poseen un papel central en la inmunidad innata mediante la detección y réplica frente a componentes bacterianos, señales de peligro y DNA citoplasmático potencialmente peligroso.

Autofagia

• Estas vías son importantes para la eliminación de componentes no deseados en el interior de las células como orgánulos dañados, patógenos intracelulares e incluso para reciclar el material citoplasmático y mantener así, la homeostasis celular.

• Se ha demostrado que la autofagia interactúa con PRRs tales como TLR, NLRs y RLRs y así regular la inflamación.

 

Líneas Celulares

InvivoGen suministra una amplia gama de líneas celulares para estudios relacionados con la inmunidad innata:

• Línea celular HEK-293:

  • Sobreexpresa uno o varios TLR/NOD.

 

• Línea celular HEK-293:

  • Sobreexpresa uno o varios TLR/NOD + un gen reportado (NF-kB inducible SEAP).

• Línea celular THP-1, RAW o MEF:

  • Expresión endógena de TLRs y NODs + un gen reportado (NF-kB inducible SEAP).

• Línea Celular HEK-azul TLR y HEK-Azul NOD.
• Línea Celular THPI-XAzul.
• Células RAMOS-Azul.
• Células RAW-Azul.

Las Características de las líneas celulares originales son:

• Línea celular 293:
  • Poca expresión endógena de cualquier TLR.

• • Línea celular adherente fácil de cultivar y transfectar.

• Línea celular THP-1:
  • Modelo de línea celular de monocitos humanos.

• • Expresión endógena del TLR 2, 4, 5 y 8.

• • Línea celular suspendida difícil de transfectar.

• Línea celular RAW:
  • Modelo de línea celular de macrófagos murinos.

• • Expresión endógena del TLR 3, 4, 7 y 9.

• • Línea celular suspendida difícil de transfectar.

• Línea celular RAMOS:
  • Modelo de línea celular B.

• • Expresión endógena del TLR 3, 7, 8, 9 y NOD1.

• • Línea celular suspendida difícil de transfectar.

• Células MEF:
  • Línea celular adherente derivada de fibroblastos embrionarios murinos.

• • CH3/WT expresa endógenamente TLR 2, 3, 4 (expresión muy fuerte) y 5.

• • CH3/TLR4mut es un mutante de CH3/WT que no expresa TLR4.