LDH‑Blue™ Plus Cytotoxicity Assay Kit
Ensayo colorimétrico avanzado para medición precisa de citotoxicidad celular
El LDH‑Blue™ Plus Cytotoxicity Assay Kit de InvivoGen es una versión mejorada del clásico ensayo LDH, diseñada para ofrecer mayor estabilidad, sensibilidad y precisión en la cuantificación de la muerte celular.
Este kit permite medir la actividad de la deshidrogenasa de lactato (LDH) liberada al medio por células dañadas o lisadas, proporcionando un indicador fiable de pérdida de integridad de la membrana celular.
Ventajas clave
Nueva formulación mejorada (LDH‑Blue™ Plus)
Mayor estabilidad de los reactivos y resultados más reproducibles.
Señal azul altamente diferenciada
El producto de reacción genera un color azul/púrpura claramente distinguible del rojo fenol, eliminando interferencias típicas de los ensayos LDH convencionales.
Alta sensibilidad y bajo fondo
Minimiza la señal basal derivada de liberación espontánea de LDH, mejorando la precisión del análisis.
Amplio rango dinámico y excelente linealidad
Permite cuantificar con precisión distintos niveles de citotoxicidad en una amplia variedad de tipos celulares.
Resultados comparables a métodos fluorescentes
Alta fiabilidad sin necesidad de instrumentación compleja.
Ensayo rápido y sencillo
Formato “Add, Mix & Read” con resultados en menos de 30 minutos.
Formatos Disponibles del LDH-Blue Kit
Este kit está disponible en presentaciones adaptadas a diversas necesidades experimentales:
Aplicaciones
- Ensayos de citotoxicidad celular
- Screening de fármacos y compuestos
- Estudios de muerte celular (necroptosis, piroptosis, ferroptosis)
- Citotoxicidad mediada por células inmunes (T, NK)
- Investigación en inflamación e inmunología
Componentes Incluidos en el Kit
El LDH-Blue Kit contiene todo lo necesario para realizar los ensayos sin pasos complicados:
- Mezcla Reactiva (Liofilizada): Contiene los sustratos y enzimas necesarias para llevar a cabo la reacción colorimétrica.
- Buffer de Ensayo y Buffer de Lisis: Proporcionan las condiciones óptimas para la actividad enzimática y la liberación de LDH.
- Solución de Parada: Permite detener la reacción en un tiempo específico para obtener una lectura puntual, especialmente útil para ensayos múltiples.
Recomendaciones de Almacenamiento y Estabilidad
- Mezcla Reactiva: almacenar a -20°C.
- Buffers: conservar a 4°C.
- Estabilidad de hasta 12 meses si se almacenan correctamente.
Principio del ensayo
La deshidrogenasa láctica (LDH) es una enzima citosólica estable que se libera al medio extracelular como consecuencia de la pérdida de integridad de la membrana plasmática, por lo que constituye un marcador fiable de daño celular.
El ensayo cuantifica la actividad de la LDH mediante una reacción enzimática acoplada que provoca la reducción de un sustrato tetrazolio y la formación de un producto formazán de color azul. La intensidad de este producto es directamente proporcional a la actividad de la LDH liberada y se determina mediante medición espectrofotométrica a 650 nm.
Procedimiento Paso a Paso para el Ensayo
Preparación de las muestras
1. Recolecte el sobrenadante de los cultivos celulares tratados y no tratados.
2. Transfiere 100 µl del sobrenadante a una placa de 96 pocillos.
Adición de reactivos y medición de absorbancia
1. Añade la Mezcla Reactiva.
2. Incuba durante 10 a 30 minutos a temperatura ambiente.
3. (Opcional) Añade la Solución de Parada.
4. Lee la absorbancia a 650 nm.
Especificaciones técnicas
- Tipo de ensayo: colorimétrico
- Tiempo total: < 30 minutos
- Lectura: absorbancia (650 nm)
- Formato: placa de 96 pocillos
- Compatibilidad: medios con y sin fenol rojo
Preguntas Frecuentes sobre el Kit LDH-Blue
¿Se puede usar en medios con suero?
¿Se puede usar en medios con suero?
Sí, el kit es compatible con medios con y sin suero.
¿Qué espectrofotómetro necesito?
¿Qué espectrofotómetro necesito?
Cualquier lector de microplacas que mida absorbancia a 650 nm es suficiente.
¿Cómo compararlo con otros kits LDH del mercado?
¿Cómo compararlo con otros kits LDH del mercado?
Ofrece mayor estabilidad, mejor sensibilidad y menos interferencias por componentes del medio.
¿Puede aplicarse en organoides y cultivos 3D?
¿Puede aplicarse en organoides y cultivos 3D?
Sí, es uno de los pocos kits aptos para estructuras celulares complejas.
¿Se necesita optimización previa para cada línea celular?
¿Se necesita optimización previa para cada línea celular?
Se recomienda establecer controles positivos y negativos para cada nuevo tipo celular.
¿Cuánto tiempo se puede almacenar el reactivo liofilizado?
¿Cuánto tiempo se puede almacenar el reactivo liofilizado?
Hasta 1 año, si se mantiene a -20°C en condiciones secas.
Conclusión: ¿Es el LDH-Blue Kit adecuado para tu investigación?
Si buscas una herramienta sensible, confiable y fácil de usar para medir citotoxicidad, el LDH-Blue Cytotoxicity Assay Kit de InvivoGen es la solución ideal. Con su metodología simple pero precisa, se adapta a una amplia gama de aplicaciones en biomedicina, inmunología y farmacología.